Общий анализ ликвора

Общие сведения

Ликвор – спинномозговая жидкость, образующаяся путём ультрафильтрации плазмы крови и секреции в сосудистых сплетениях желудочков мозга. К функциям ликвора относятся: транспортная (перенос различных веществ), экскреторная (выведение продуктов обмена), амортизационная (путём перераспределения давления предохраняет мозг при ударах), защитная (содержит иммуноглобулины), стабилизационная (не допускает быстрого изменения состава среды при резком изменении состава крови).

Макроскопическая оценка

Нормальный ликвор бесцветен, полностью прозрачен и не сворачивается (образование сгустка не наблюдается).

Плотность

Плотность ликвора здорового животного находится в интервале 1,004-1,006.

Клиническое исследование

Цитоз – общее содержание ядерных клеточных элементов в ликворе. Для здоровых животных референсные значения цитоза следующие: ликвор собаки содержит до 5,0 тыс./мкл, ликвор кошки - 2-8 тыс./мкл.

Ликворная формула отражает процентное распределение ядерных клеток в ликворе. Изменение процентного соотношения указывает на патологию даже в том случае, если цитоз находится в передах нормы. Клеточный состав ликвора здоровых животных представлен мононуклеарными клетками, среди которых преобладают малые лимфоциты, а остальную часть составляют моноциты. В формуле допускается до 10% зрелых не дегенеративных нейтрофильных лейкоцитов. Редко в ликворе здоровых животных попадаются клетки эпендимы, клетки сосудистого сплетения или эозинофилы (< 1%).

Ликвор здорового животного не содержит эритроцитов, тем не менее, единичные клетки иногда попадаются при исследовании ликвора кошек (до 30 клеток/мкл).

Биохимическое исследование

Белок ликвора на 80-95% представлен альбумином, остальная часть приходится на глобулины. Референсные значения для цистернального ликвора < 0,45 г/л, для люмбального < 0,35 г/л.

Глюкоза: у собак и кошек должна составлять 60-80% от глюкозы крови.

Для диагностики заболеваний центральной нервной системы ранее было предложено измерение активности таких ферментов в ликворе, как креатинкиназа, ЛДГ и АСТ. Однако полученные результаты не обладали ни чувствительностью, ни специфичностью, и не несли никакого прогностического значения. Поэтому в настоящее время от данных тестов отказались.

Бактериологическое исследование

Может быть крайне полезным, но является трудновыполнимым из-за необходимости немедленного (в течение 15 минут) помещения ликвора на среду для культивирования с постановкой в термостат.

Материал

Ликвор берут путём антлантоокципитальной или люмбальной пункции. Жидкость, собранная каудальнее поражения, будет иметь большую диагностическую ценность, чем жидкость, собранная краниальнее поражения. Первую каплю необходимо спустить на салфетку, чтобы избежать попадания в пробирку путевой крови, которая значительно может повлиять на результат. Ранее в таких случаях предлагалось использовать формулы для коррекции общего числа клеток, но они оказались невоспроизводимыми и удовлетворительного результата не приносили, поэтому при подозрении на попадание путевой крови рекомендуется переделать пункцию. При этом лучше использовать новую иглу. Если три попытки взятия ликвора оказались неудачными, рекомендуется не делать пункцию в четвёртый раз из-за риска развития осложнений.

Не следует собирать ликвор в стеклянные пробирки, потому что лейкоциты могут прилипнуть к стеклу.

Если ликвор мутный или цвет его изменён, стоит отдельно собирать образец для клинического исследования (в пробирку с К3ЭДТА) и биохимического (в пробирку без антикоагулянта).

Обычно для исследования достаточно 1-1,5 мл. При этом не следует брать больше 4 мл ликвора от собаки, больше 0,5-1 мл от кошки и больше 10-20 капель от котёнка. Слишком быстрый отбор материала может представлять угрозу здоровью животного: за 30 секунд не стоить брать больше 1 мл.

Ликвор должен быть доставлен в лабораторию немедленно и исследован в течение 30-60 минут после получения. Это связано  с тем, что в ликворе очень низкое содержание белка, и клетки в такой среде быстро подвергаются дегенерации и лизису (распаду).

В случае невозможности немедленного исследования материала допускается добавление 1 капли сыворотки крови животного к 0,25 мл ликвора и хранение при температуре 4°С до 48 часов. Разведение позволит сохранить морфологию клеток, но значительно повлияет на определение цитоза. При этом отдельную порцию ликвора оставляют для определения общего белка, так как его добавление, соответственно, вызовет повышение данного показателя при измерении.

Интерпретация результатов

Изменение цвета

Розовый или красный цвет ликвора говорит о кровотечении в субарахноидальное пространство или о присутствии путевой крови. Есть несколько показателей, по которым можно отличить два этих состояния. К одному из них относится ксантохромия (жёлтое или оранжевое окрашивание ликвора или надосадочной жидкости после центрифугирования), которая говорит о присутствии свободного билирубина. Он является продуктом распада гемоглобина и обнаруживается примерно через 48 часов после кровотечения. Жёлтое окрашивание ликвора также может говорить о гипербилирубинемии.
Изменение прозрачности

Вызвано увеличенным количеством клеточных элементов (обычно более 500 клеток/мкл), присутствием бактерий, грибов или аспирированного жира.

Изменение плотности

Наблюдается редко. Снижение плотности отмечается при гидроцефалии, повышение может происходить при менингитах.

Изменение цитоза

Если количество клеток не выходит за пределы референсного интервала, это не всегда говорит об отсутствии проблемы. Часто изменение цитоза не происходит при инфекционном перитоните кошек, при вызванных чумкой энцефалитах, при новообразованиях.

Увеличение цитоза называется плеоцитозом. В зависимости от преобладающего вида клеток различают:

- Нейтрофильный плеоцитоз может быть связан с инфекционным и неинфекционным состояниями. К первым относятся бактериальные менингоэнцефалиты, тяжёлые вирусные инфекции, криптококкоз, кокцидиомикоз, токсоплазмоз и другие заболевания. Среди неинфекционных причин травмы, стероид-зависимый менингит (предрасположены бигли и бернские зенненхунды), фибро-хрящевая эмболия собак и кошек, реакция после проведения миелографии (в течение 24-48 часов после исследования), новообразования.

- Смешанный плеоцитоз: присутстсвуют клетки двух или более видов клеток (например, нейтрофилы, лимфоциты и моноциты). Может вызываться большим спектром причин, к которым относятся травма, вирусные инфекции, стероид-зависимый менингит, паразитарные инфекции, проведение миелографии, различные микозы, дегенеративные процессы, неоплазия.

- Моноцитарный плеоцитоз может наблюдаться при различного рода поражениях, например, при кровотечении в спинномозговой канал, дискоспондилитах, гранулематозном менингоэнцефалите, некрозе и других.

- Лимфоцитарный плеоцитоз: среди причин – некротизирующий энцефалит собак маленьких пород, новообразование, дегенеративные процессы.

- Эозинофильный плеоцитоз может быть идиопатическим или инфекционным. К последнему относятся протозойные инфекции (токсоплазмоз), микозы, паразитарные (например, миграции личинок дирофилярий), вирусные инфекции (чума, бешенство).  Может наблюдаться при новообразованиях. Идиопатические причины отмечаются редко. В литературе описаны отдельные исследования, выделяющие породную (золотистые ретриверы и ротвейлеры) и половую предрасположенность (все особи – кобели).

Другие клеточные элементы

Эритроциты свидетельствуют о попадании путевой крови или о кровотечении.
В ликворе могут быть обнаружены макрофаги с фагоцитированным материалом: например, эритроцитами, что будет говорить о кровотечении в спинномозговом канале, произошедшем не менее 12 часов назад.

Плазматические клетки: могут быть частью неспецифической реакции или воспалительного процесса, связанного с антигенной стимуляцией.

Возможно обнаружение клеток новообразований: первичных или метастазов.

Изменение биохимических свойств

Повышенное содержание белка может быть связано с кровотечением (истинным или при попадании путевой крови), с увеличением проницаемости гематоэнцефалического барьера или с интратекальным синтезом иммуноглобулинов. Обычно при данных процессах также отмечают увеличение цитоза. Если же его нет, а содержание белка повышено, это может говорить о дегенеративных или неопластических процессах, о вирусной инфекции, о травме спинного мозга. Содержание белка без увеличения цитоза также может наблюдаться при лихорадке, миеломаляции, смещении межпозвоночного диска.

Бактерии

Могут обнаруживаться при контаминации образца. Для подтверждения бактериального инфекционного процесса необходимо обнаружение фагоцитоза.

Фагоцитоз

Это процесс захвата бактерий нейтрофилами и их переваривания. Уверенно указывает на бактериальное воспаление.

Глебова О.А.
Главный врач  ветеринарной лаборатории «BIOVETLAB»

ЭТО ИНТЕРЕСНО: